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邱聪花 (邱聪花.) [1] | 罗蒙 (罗蒙.) [2] | 林娟 (林娟.) [3] (Scholars:林娟) | 叶秀云 (叶秀云.) [4] (Scholars:叶秀云) | 王国增 (王国增.) [5] (Scholars:王国增)

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Abstract:

以大布苏盐碱湖分离菌Alkalibacterium sp.SL3的DNA为模板,利用PCR扩增 α-半乳糖苷酶基因(galSL3),构建重组质粒pET-22b-galSL3,转化至大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达重组酶(rGalSL3).通过镍柱亲和层析分离纯化重组酶,并对纯化的重组酶进行性质研究.研究表明,纯酶rGalSL3最适pH值为5.5,最适温度为55℃;该酶在pH值5.0~10.0保持90%以上的剩余酶活,在50℃有非常好的热稳定性.在0~1.5 mol?L-1 NaCl溶液中该酶的酶活基本不受影响,在3.0 mol?L-1 NaCl溶液中有很好的稳定性.Pb2+、Ca2+、Co2+、Li+、Na+、K+、Triton-100和β-mercaptoethanol等对重组酶的活性有明显的促进作用.该酶水解对硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷的Km、vmax和kcat分别为(2.64±0.02)μmol?mL-1、(454.55±0.59)μmol?(mg?min)-1和(347.73±1.27)s-1.重组酶可水解蜜二糖和棉籽糖,不能水解瓜尔豆胶.

Keyword:

α-半乳糖苷酶 嗜盐嗜碱菌 基因克隆 性质分析 表达

Community:

  • [ 1 ] [邱聪花]福州大学生物科学与工程学院,福建省海洋酶工程重点实验室,福建 福州 350108
  • [ 2 ] [罗蒙]福州大学生物科学与工程学院,福建省海洋酶工程重点实验室,福建 福州 350108
  • [ 3 ] [林娟]福州大学生物科学与工程学院,福建省海洋酶工程重点实验室,福建 福州 350108
  • [ 4 ] [叶秀云]福州大学生物科学与工程学院,福建省海洋酶工程重点实验室,福建 福州 350108
  • [ 5 ] [王国增]福州大学生物科学与工程学院,福建省海洋酶工程重点实验室,福建 福州 350108

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福州大学学报(自然科学版)

ISSN: 1000-2243

CN: 35-1337/N

Year: 2019

Issue: 1

Volume: 47

Page: 136-142

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