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克隆一个来源于串珠镰孢菌(Fusarium moniliforme Sheld)的角质酶基因,该基因全长693 bp,编码231个成熟的氨基酸.克隆的角质酶基因构建到pPIC9K质粒,获得重组表达裁体,转入毕赤酵母(Pichia pastoris Gs115)中进行高效表达.经甲醇诱导96 h,测得重组酶酶活为71.68 U/mL,经纯化获得比活力为2490.1 U/mg.对纯化后的角质酶进行酶学性质分析结果表明,其最适反应pH为9.0,在pH5.0~9.0范围内之间重组角质酶的酶活相对稳定;最适反应温度为35 ℃,在40 ℃条件下保温1 h酶活力保持70%以上.KCl、Triton X-100、MnCl2、SDS对该酶活有促进作用,NaCl、BaCl2、CuSQ、Tween-20、FeSO4、ZnSQ、NiCl2、EDTA、Tween-80对该酶活有抑制作用.
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食品工业科技
ISSN: 1002-0306
CN: 11-1759/TS
Year: 2018
Issue: 18
Volume: 39
Page: 87-92
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