In　this　paper,　we　developed　a　simple　and　effective　on-line　focusing　technique　combining　dynamic　pH　junction　and　sweeping　by　capillary　electrophoresis　(CE)　with　laser-induced　fluorescence　(LIF)　detection.　Dynamic　pH　junction-sweeping　is　defined　when　the　sample　has　a　different　buffer　pH　(dynamic　pH　junction　condition)　and　is　devoid　of　micelles　(sweeping　condition)　relative　to　the　background　electrolyte　(BGE).　This　hyphenated　focusing　mode　was　applied　to　the　sensitive　and　selective　focusing　of　four　dipeptides:　Tyr-Phe,　Tyr-Leu,　Trp-Gly,　and　Ala-Gln.　Picomolar　detectability　of　these　dipeptides　by　CE-LIF　detection　was　demonstrated　through　effective　focusing　of　large　sample　volumes　(up　to　39%　capillary　length)　using　the　dual　pH　junction-sweeping　focusing　mode.　25　mmol　L-1　sodium　dihydrogen　phosphate,　pH　2.5　was　used　as　the　sample　matrix,　and　100　mmol　L-1　borate,　21　mmol　L-1　sodium　dodecylsulfate　(SDS),　16　mmol　L-1　Brij35,　pH　9.0　as　the　background　solution　(BGS).　The　concentration　detection　limits　(S/N　=　3)　of　the　four　dipeptides　were　in　the　range　of　1.0-5.0　pmol　L-1.　The　developed　method　has　been　successfully　used　for　the　determination　of　dipeptides　in　human　serum　samples.　©　2011　The　Royal　Society　of　Chemistry.