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何火聪 (何火聪.) [1] | 苏颖 (苏颖.) [2] | 潘剑茹 (潘剑茹.) [3] (Scholars:潘剑茹) | 黄争荣 (黄争荣.) [4]

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目的:制备TAT-ASPP2融合蛋白,探讨其对人胶质瘤U-87MG细胞和U251细胞增殖的抑制作用.方法:设计TAT-ASPP2引物,应用IN-Fusion技术构建原核表达质粒pET-TAT-ASPP2,双酶切、DNA测序鉴定后转化大肠杆菌E coli BL21,IPTG诱导TAT-ASPP2融合蛋白的表达,SDS-PAGE和Western blotting鉴定TAT-ASPP2融合蛋白.MTT法检测TAT-AS-PP2融合蛋白对U-87MG和U251细胞增殖的作用.结果:成功构建了原核表达质粒pET-TAT-ASPP2,转化E.coli BL21后成功表达TAT-ASPP2融合蛋白,其相对分子质量约为128 000,并可被ASPP2特异性抗体所识别.TAT-ASPP2融合蛋白对U-87MG和U251细胞增殖的抑制率分别为(65.0±3.0)%和(64.7±2.5)%,而ASPP2蛋白则不能抑制U-87MG和U251细胞的增殖.结论:成功地克隆、表达及纯化TAT-ASPP2融合蛋白,该融合蛋白可抑制胶质瘤细胞的增殖.

Keyword:

TAT-ASPP2 增殖 胶质瘤 融合蛋白

Community:

  • [ 1 ] [何火聪]福建医科大学附属教学医院,暨,福建省肿瘤医院
  • [ 2 ] [苏颖]福建医科大学附属教学医院,暨,福建省肿瘤医院
  • [ 3 ] [潘剑茹]福州大学
  • [ 4 ] [黄争荣]福建医科大学附属教学医院,暨,福建省肿瘤医院

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Source :

中国肿瘤生物治疗杂志

ISSN: 1007-385X

CN: 31-1725/R

Year: 2011

Issue: 1

Volume: 18

Page: 42-45

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