目的构建麻疹病毒血凝素蛋白基因的重组质粒,使其在大肠埃希菌中表达HA蛋白,为麻疹病毒诊断奠定基础。方法从麻疹病毒株MV07—30中提取核糖核酸,用RT—PCR扩增HA基因,用限制性内切酶BamHI和HindⅢ双酶切HA基因片段和pGEM—Teasy载体,连接后获得重组质粒pGEM—Teasy—MVHA并克隆到大肠杆菌表达载体pET28a(+);用IPTG诱导重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达;利用SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术进行重组蛋白表达的分析;通过Ni—NTA亲和层析获得高纯度目的蛋白。结果lit—PCR获得的HA基因片段约长1700bp。转化的大肠杆菌表达产物在SDS—PAGE中出现与目的蛋白分子量相一致的条带,且重组蛋白主要以包涵体形式存在;血凝及血凝抑制实验显示表达产物具有良好的抗原性。结论构建麻疹病毒HA基因的原核表达体系,纯化的重组蛋白可用作麻疹病毒检测的抗原。