为阐明BbRho5对球孢白僵菌生防潜能的作用，构建了Bbrho5单基因敲除菌株ΔBbrho5，以野生型菌株WT作为对照，在不同培养基上测定菌落生长速率，并测定了菌株对多菌灵胁迫耐受性及对大蜡螟幼虫体壁侵染能力。进一步获取和分析了ΔBbrho5和WT细胞内基因转录组数据。结果表明，BbRho5蛋白功能缺陷显著抑制球孢白僵菌菌丝生长速率，同时微弱影响其多菌灵胁迫抗逆性及生防能力。相较于WT，ΔBbrho5中具有770个差异表达基因(DEGs)，其中上调基因395个，下调基因375个。GO分析显示，ΔBbrho5　VS　WT中DEGs主要富集于氧化还原酶活力(oxidoreductase　activity)和单加氧酶活力(monooxygenase　activity)功能。KEGG通路富集结果显示，DEGs主要富集于氮代谢及多种氨基酸代谢通路。在氮代谢通路中富集到7个功能基因，其中有5个上调，2个下调，说明敲除菌株可能采用增强氮源利用及谷氨酸合成以应对Bbrho5缺陷引起的生长迟缓。以上研究结果揭示了球孢白僵菌中小GTP酶BbRho5对球孢白僵菌生长速率具有重要影响，且氮代谢和氨基酸代谢可能为其重要的响应代谢通路。