目的　以人源Oct4基因启动子为靶点构建双荧光素酶报告基因载体，建立高通量药物筛选细胞模型，筛选能显著上调Oct4基因启动子活性的海洋来源微生物次级代谢产物。方法　将人源Oct4基因启动子序列克隆至萤火虫荧光素酶报告基因载体pGL6-TA，构建重组质粒pGL6-TA-Oct4-luc并与内参质粒p　RL-SV40-C瞬时共转染293T细胞，以OAC1作为激活剂，建立双荧光素酶报告基因筛选系统，通过检测相对荧光素酶表达水平的变化反映Oct4基因启动子活性，对309份海洋来源微生物发酵粗提物样品进行活性筛选；CCK-8法检测粗提物对间充质干细胞活力的影响。结果　双酶切和基因测序法证实重组质粒构建正确；将质粒转染293T细胞后，与空载pGL6-TA相比较，重组质粒pGL6-TA-Oct4-luc具有显著启动子活性（P＜0.05）；与0μmol/L相比较，粗提物Z-179-1处理细胞24　h后Oct4基因启动子活性明显升高（P＜0.05），作用质量浓度为10μg/mL时效果最为显著；CCK-8法检测结果显示Z-179-1显著促进间充质干细胞的增殖，且呈剂量依赖性。结论　成功建立了靶向人源Oct4基因启动子的药物高通量筛选细胞模型，并筛选出海洋来源微生物发酵粗提物Z-179-1，能显著活化Oct4基因启动子，其活性成分值得开展进一步化学研究。