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吴晨烁 (吴晨烁.) [1] | 李晓月 (李晓月.) [2] | 秦明珍 (秦明珍.) [3] | 严芬 (严芬.) [4] (Scholars:严芬)

Indexed by:

CQVIP PKU CSCD

Abstract:

从海洋来源的假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)B1基因组中克隆1个褐藻胶裂解酶基因,并在大肠杆菌中实现异源表达,分离纯化重组酶并研究其酶学性质.通过Touch down PCR与热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)从假交替单胞菌B1基因组中扩增到1个褐藻胶裂解酶基因(B1SM),将目的基因插入到pGEX-4T-1载体,转化到宿主大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)BL21 (DE3).结果显示,从菌株B1克隆得到褐藻胶裂解酶基因B1SM,序列长度为1 005 bp,编码334个氨基酸,理论等电点为8.51,编码蛋白质的理论分子质量为37.13 kDa.重组褐藻胶裂解酶B1SM的最适pH和温度分别为8.0和25℃.该褐藻胶裂解酶在pH 7.0 ~9.0范围内,25℃下保温1h,仍剩余60%以上活力,pH稳定性较好.在最适pH 8.0和30℃下保温1h重组酶仍剩余60%以上活力.该研究为褐藻胶裂解酶基因B1SM在E.coli BL21(DE3)中实现了异源表达,为褐藻胶裂解酶的制备和研究奠定基础.

Keyword:

假交替单胞菌 聚合酶链反应 褐藻胶裂解酶

Community:

  • [ 1 ] [吴晨烁]福州大学
  • [ 2 ] [李晓月]福州大学
  • [ 3 ] [秦明珍]福州大学
  • [ 4 ] [严芬]福州大学

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Source :

食品与发酵工业

ISSN: 0253-990X

CN: 11-1802/TS

Year: 2019

Issue: 3

Volume: 45

Page: 77-82

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