Abstract:
猪胃蛋白酶作为重要的消化酶,广泛应用于农产品蛋白质水解加工以及医药与养殖工业中。本文尝试利用巴斯德毕赤酵母表达体系大量制备猪胃蛋白酶原A。首先用化学法合成猪胃蛋白酶原A(pepsinogen A,pA)基因,并构建重组质粒pGAPZα-pA;然后利用化学转化技术,将该基因整合到毕赤酵母X-33菌株的染色体上,构建表达菌株Pp-pA。该菌株在摇瓶培养条件下经甲醇诱导分泌表达的猪胃蛋白酶原A酶活就达到5250U/L。发酵液上清经过DEAE离子交换色谱和Sephacryl S200凝胶过滤色谱分离,得到纯化倍数为96.7的电泳纯pA。活化pA后获得比活达到52800 U/g的猪胃蛋白酶。
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Year: 2010
Language: Chinese
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