本工作从中国临床最常见的5种荚膜血清型肺炎链球菌(FY01,　FY05,　FY6B,　FY19F,　FY23F)克隆获得编码PspA蛋白N端α-螺旋区的基因片段。分别将5种PspA基因片段克隆到表达载体pET-27b(+)上,　成功构建重组质粒pET-pspA,　转化大肠杆菌BL21(DE3)。经乳糖诱导表达和亲和层析分离,　获得高纯度重组蛋白。通过家族专属引物PCR的方法鉴定这5种荚膜血清型肺炎球菌的PspA蛋白所属家族,　并进一步根据基因测序结果通过生物信息学方法鉴定了所属支系。FY01　rPspA、FY6B　rPspA、FY19F　rPspA同属于家族Ⅰ支系1,　FY05　rPspA属于家族Ⅰ支系2,　FY23F　rPspA属于家族Ⅱ支系3。以FY01　rPspA免疫小鼠,　在20　μg/mL免疫剂量时抗体滴度达到1:　210000,　显示了重组蛋白较好的免疫原性。Western　blotting交叉免疫反应性研究表明,　抗FY01　rPspA抗血清与FY01　rPspA、FY6B　rPspA和FY19F　rPspA反应性较好,　而与另外两种重组蛋白几乎无反应,　提示PspA交叉免疫作用仅限于本支系内。动物保护实验表明,　FY01　rPspA免疫的小鼠对FY6B、FY01　两种菌的攻击具有较好的保护作用,　对FY05、FY23F的攻击未见明显的保护作用。本研究成果对于研制高效肺炎球菌疫苗具有重要的指导意义。