采用凝胶过滤色谱法对重组琼胶酶AgaP4383降解琼胶的终产物新琼寡糖进行分离纯化，并采用离子交换色谱(IEC)和电喷雾飞行时间质谱(ESI-TOF-MS)对纯化产物的纯度及分子量进行分析；利用CCK-8法检测新琼四糖对角质形成细胞活力的影响，并通过酶联免疫吸附试验和免疫荧光法检测新琼四糖对角质形成细胞保湿相关蛋白(FLG、AQP3、ZO-1)表达量的影响。结果表明：重组琼胶酶AgaP4383降解琼胶得到的产物经过Bio-Gel　P2　fine凝胶柱分离可得到纯度为96.53%、相对分子量为630的新琼四糖，得率为78.4%;新琼四糖在0.062　5～1　mg/mL的质量浓度范围内对角质形成细胞的活力无明显影响，生物相容性良好；新琼四糖在质量浓度为0.125　mg/mL和0.5　mg/mL时能够显著提高角质形成细胞中丝聚蛋白FLG、水通道蛋白AQP3及紧密连接蛋白ZO-1的表达水平(P＜0.05),在保湿类化妆品方面具有较好的开发利用价值。