目的:去除重组毕赤酵母表达人Cu,Zn-SOD蛋白溶液中的内毒素,为后续活体动物试验和临床应用提供基础数据.方法:采用Triton　X-114萃取与活性炭吸附两种方法单独使用或联合使用的纯化方案,比较不同纯化方案对去除重组蛋白溶液中内毒素以及目标蛋白回收率的效果.结果:通过单因素条件优化,确定重组蛋白溶液最佳操作pH为5.0,活性炭最适添加量为5％以及Triton　X-114最适添加量为1％(体积分数).最后确定活性炭吸附和Triton　X-114萃取法联合使用的三步法操作工艺,可高效去除重组蛋白溶液中内毒素.终产品内毒素含量降至26.8EU/10000　U　SOD,去除率达到99.8％,目标蛋白回收率为66％,Triton　X-114残余量为5.7μg/mL.结论:纯化后所得重组SOD蛋白溶液符合中国药典规定的注射用针剂中内毒素限量与Triton残余量的质量要求,可用于潜在的保健食品开发.