通过生物学试验，构建依纽小单孢菌　TS388（Micromonospora　inyoensis　TS388）中　sisI　基因缺失工程菌，再通过分析其次级代谢产物的变化，揭示西索米星生物合成基因簇上　sisI　基因的功能。首先构建用于　sisI基因框内敲除的穿梭载体　pKTI3，经接合转移导入依纽小单孢菌　TS388中，通过影印筛选及　PCR　鉴定获得sisI　功能缺失工程菌　TI1102（△sisI　）。工程菌经发酵，提取代谢产物，再经　TLC　及　MS　分析，用以比较亲株与工程菌代谢产物结构的差异。结果显示：工程菌　TI1102代谢产物结构发生变化，不再合成西索米星，主要积累中间代谢产物　JI-20A，由此证明了　sisI　基因参与了　JI-20A　到西索米星的3′，4′双脱羟基作用。获得主产　JI-20A　的工程菌为该类半合成药物提供了重要前导化合物。