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马振宁 (马振宁.) [1] | 郑磊 (郑磊.) [2] | 林海关 (林海关.) [3] | 郑允权 (郑允权.) [4] | 唐凤翔 (唐凤翔.) [5] | 石贤爱 (石贤爱.) [6] | 郭养浩 (郭养浩.) [7] (Scholars:郭养浩)

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Abstract:

目的:制备抗副溶血弧菌OmpW的单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性.方法:利用生物信息学方法分析多种病原弧菌的OmpW氨基酸序列,原核表达并纯化制备r-OmpW.以r-OmpW作为免疫抗原制备鼠mAb,以五种病原弧菌为筛选抗原.采用Western blot、流式细胞术(FCM)、间接ELISA法鉴定mAb的特性.结果:生物信息学分析表明OmpW是弧菌内高度保守的外膜蛋白.成功筛选到3株杂交瘤细胞株,其中,杂交瘤细胞株S5C10分泌的mAb的Ig亚类(型)为IgG3,腹水mAb效价达4.6×104.该mAb同时识别副溶血弧菌、溶藻弧菌、哈维氏弧菌、鳗弧菌和创伤弧菌,而与荧光假单胞菌、温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌及大肠杆菌无明显的交叉反应.结论:制备的mAb可特异性识别上述5种病原弧菌,为进一步建立广谱弧菌的免疫学检测方法提供了工具.

Keyword:

OmpW 单克隆抗体 原核表达 弧菌 流式细胞术

Community:

  • [ 1 ] [马振宁]福州大学
  • [ 2 ] [郑磊]福州大学
  • [ 3 ] [林海关]福州大学
  • [ 4 ] [郑允权]福建省医疗器械与医药技术重点实验室,福建福州,350002
  • [ 5 ] [唐凤翔]福建省医疗器械与医药技术重点实验室,福建福州,350002
  • [ 6 ] [石贤爱]福建省医疗器械与医药技术重点实验室,福建福州,350002
  • [ 7 ] [郭养浩]福州大学

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Source :

细胞与分子免疫学杂志

ISSN: 1007-8738

CN: 61-1304/R

Year: 2011

Issue: 9

Volume: 27

Page: 982-984,988

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