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庆大霉素生物合成过程中的genP基因和西索米星生物合成过程中的sisⅠ基因属同工异源酶基因,均能催化绛红糖胺3’,4’-双脱羟基反应.本研究借助组合生物合成,探索绛红小单孢菌中的genP基因能否在依纽小单孢菌中表达.首先构建genP基因替换sisⅠ基因的同源重组质粒pKPI4,并经接合转移将其导入依纽小单孢菌TS388中,最后再通过影印筛选及PCR鉴定获得genP基因替换sisⅠ基因的工程菌PTI886.将野生型菌株TS388、sisⅠ基因缺失突变株TII1 102(TS388△sisⅠ)及工程菌PTI886在同等条件下进行发酵,提取其代谢产物并经薄层层析及质谱分析.结果表明,突变株TII1 102不能合成西索米星,而工程菌PTI886仍能继续合成西索米星,且代谢产物组分与野生型菌株TS388相比无明显变化,说明genP基因能在依纽小单孢菌中表达.本研究揭示了同工异源酶基因异源表达的可行性,可为今后不同微生物异源基因组合的研究提供借鉴.
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石河子大学学报：自然科学版
ISSN： 1007-7383
Year： 2016
Issue： 5
Volume： 34
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