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目的 运用核糖体展示技术筛选高特异性抗呋喃唑酮(furazolidone,FZD)单链抗体,并进行初步分析.方法 提取小鼠杂交瘤细胞总RNA,利用反转录PCR及重叠延伸(splicing by overlap extension,SOE)-PCR技术合成VH-linker-VL单链抗体文库.采用TNT T7 Quick for PCR DNA试剂盒对单链抗体文库进行体外翻译及筛选,经过三轮筛选富集目的基因,对目的基因进行原核表达及纯化后,初步分析其特异性及亲和力.结果 获取1株特异性较高的单链抗体FZD-ScFv1,IC50值为13.01 ng/mL,与呋喃它酮、呋喃妥因、氨基脲、呋喃西林及其衍生物之间的交叉反应率均小于1％.结论 利用核糖体展示技术成功获得亲和力较好的单链抗体,该抗体可用于建立ELISA法,为FZD残留量的快速检测提供了新的思路.
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中国生物制品学杂志
ISSN： 1004-5503
CN： 22-1197/Q
Year： 2023
Issue： 1
Volume： 36
Page： 59-64
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