为探索雨生红球藻渣多糖的综合利用价值，本研究采用40%、60%和80%的乙醇梯度分离雨生红球藻渣多糖，依次得到HP40、HP60、HP80三个粗多糖组分，通过高效液相色谱（HPLC）、傅里叶红外光谱（FT-IR）、凝胶色谱-示差-多角度激光光散射系统（HPSEC-MALS-RI）等方法对各组分多糖的单糖组成、分子量、结构、粒径和Zeta电位等理化特性进行分析，并测定其抗氧化活性。结果表明，乙醇浓度显著影响所沉淀雨生红球藻渣多糖的理化性质和抗氧化活性。醇沉粗多糖的得率和纯度随着乙醇浓度的增加而降低，并且乙醇浓度越高，沉淀的粗多糖分子量越低。本研究提取的粗多糖的纯度较高，其中HP40的总糖含量可达99.46%±0.015%。三种组分均包含Glc、Man、Gal、Ara、Rha、Xyl、Fuc、Glc-UA这8种单糖，但单糖组成及比例并不相同，与HP40相比，HP60和HP80还含有核糖，共有9种单糖。HP的粒径和Zeta电位分析结果表明，HP80的粒径最小（73.505±2.405　nm）且Zeta电位的绝对值最大（−11.6　mV）。抗氧化分析结果表明，HP80的抗氧化活性最强，且对羟自由基的清除率最高可达96%以上（10.0　mg/mL）。综上所述，梯度醇沉可以对雨生红球藻渣多糖进行初步分离，得到单糖组成、粒径、分子量、抗氧化活性各不相同的粗多糖。其中，40%乙醇所沉淀的粗多糖得率和糖含量最高，80%乙醇所沉淀的粗多糖分子量最小、抗氧化能力最强。